在肿瘤免疫治疗的“军备竞赛”中，CD3 抗体凭借“激活 T 细胞并精准杀伤肿瘤细胞”的核心机制，已成为双特异性抗体、CAR-T 等前沿疗法的关键“技术锚点”。然而，CD3 家族成员之间高度同源，且 T 细胞激活极为敏感，使脱靶效应成为研发过程中真正决定成败的关键检查点。康源博创利用 CRISPR 基因编辑技术构建 CD3 敲除报告细胞系，并结合 MPSA-AB5000 脱靶筛选平台，为 CD3 抗体开发注入“精准导航”的核心驱动力。
I. CD3 抗体：免疫治疗的“万能钥匙”及研发挑战
作为 T 细胞表面的标志性受体，CD3 分子与 TCR 形成复合物并传递激活信号，是连接“肿瘤识别”和“启动细胞毒杀伤”的关键枢纽：
双特异性抗体领域的“黄金搭档”：靶向 CD3 的双特异性抗体通过“肿瘤抗原与 T 细胞”的双桥接机制，实现 T 细胞在肿瘤微环境中的精准富集和激活。目前，全球在研 CD3 双特异性抗体超过 80 个，覆盖 Claudin18.2、BCMA、CD20 等 20 余个靶点。其中，安进的 Blincyto（CD19×CD3）已获批，罗氏的 RG7828（又称 Mosunetuzumab，CD20×CD3）也已用于部分血液系统恶性肿瘤相关研究项目。
CAR-T 疗法的“信号核心”：CD3ζ 链是 CAR 构建体中的“信号转导单元”。其胞内结构域的激活效率直接决定 CAR-T 细胞毒杀效力与毒性之间的平衡。带有 CD3ζ 突变的新一代 CAR-T 正通过优化信号强度来降低细胞因子释放综合征（CRS）风险。
II. MPSA-AB5000 脱靶筛选平台 + CD3 基因敲除报告细胞：让 CD3 抗体脱靶信号“无处遁形”
基于精准 CRISPR/Cas9 编辑技术构建的 CD3-KO 报告细胞系（Jurkat-NFAT-Luc2-CD3D-CD3E-KO-CD16a-V158），通过定向敲除 CD3 基因，成为评估 CD3 抗体特异性的关键工具，可覆盖从精准脱靶筛选到 ADCC 效应评价等应用场景。其核心价值体现在两个维度：
消除背景干扰：传统 CD3 抗体检测常因“靶点背景干扰”而误判特异性。CD3-KO 细胞可实现“靶向信号”和“脱靶信号”的绝对分离。实验逻辑是：比较 CD3 野生型报告细胞（荧光素酶报告基因，信号反映“特异性结合 + 脱靶结合”）与 CD3-KO 细胞（信号仅反映“脱靶结合”）时，两者差值即代表真实靶向活性，从而提供更大的实验窗口。
去除 T 细胞激活因素，聚焦结合层面的脱靶风险：通过检测靶细胞表面不同 CD3 家族成员的表达情况，可评估是否存在对 CD3 家族成员的非特异性结合。
III. 不止 CD3 敲除报告细胞：CRISPR 编辑细胞库的“平台价值”
该平台并不局限于 CD3-KO 报告细胞，还覆盖双背景靶细胞，例如 293T-B7H3-KO 细胞系。目前，我们已构建覆盖 80 余个靶点的 293T 敲除细胞系（如 CD47、EGFR 等），可支持脱靶筛选、ADC 分子评价等多样化体外检测场景。
基因编辑阴性对照细胞系是免疫治疗药物特异性评价的“金标准”。康源博创不仅可提供 293T-B7H3-KO 细胞的定制与供应，还可整合 MPSA-AB5000 平台，提供“脱靶筛选 + 功能验证”的一站式服务，确保每一个靶向药物在进入临床前都能清晰“看见”潜在风险。
