在生物医药研发中，候选分子的开发始终伴随重大的科学挑战和临床转化风险，其中脱靶结合因潜在临床影响而日益受到关注。抗体药物作为高度特异性的生物药，其精准靶向能力直接决定治疗窗口。然而，由于生物系统分子复杂性（包括蛋白同源性和构象多态性），抗体分子可能与非预期靶点发生交叉反应，这一现象被称为多特异性结合。这不仅可能严重降低药物疗效，更可能导致一系列不可预测的不良反应，从轻微不适到危及生命的毒性反应，给患者带来巨大风险。例如严重不良反应（如器官毒性、细胞因子风暴）、疗效下降（抗体被脱靶结合消耗）以及临床试验终止（监管叫停）等。
例如，抗 PD1 抗体 SHR-1210 在 I 期临床试验中意外引发严重毛细血管瘤。研究认为这些不良事件与其脱靶结合 VEGFR2 有关；SHR-1210 不仅可结合 VEGFR2，还可作为激动剂促进血管生成，从而在体内导致毛细血管瘤。另一项非人灵长类研究中，抗 β-淀粉样蛋白抗体 ABT-736 因脱靶结合恒河猴血小板因子 4 导致严重毒性，被迫终止开发。在漫长而艰难的抗体药物开发过程中，脱靶效应如同隐藏暗礁，随时可能使研发之船触礁，大幅增加研发成本和失败风险。因此，在开发早期准确检测和评估抗体脱靶效应，已成为生物医药研究中亟待解决的关键问题。
美国 Integral Molecular 公司在论文“The emergence of cell-based protein arrays to test for polyspecific off-target binding of antibody therapeutics”中，系统讨论了基于细胞的蛋白阵列技术在抗体脱靶筛选中的应用，为抗体药物开发安全性评价提供了创新思路。康源博创 MPSA-AB5000 膜蛋白工程筛选平台也在这一关键领域发挥重要作用，与 Integral Molecular 的技术理念相呼应，并从独特角度助力解决抗体脱靶挑战。
MPSA-AB5000 平台：应对脱靶问题的有力武器
康源博创推出 MPSA-AB5000 膜蛋白工程筛选平台，为抗体特异性筛选和 CAR 改造免疫细胞抗原识别特异性评价提供全面、高效的解决方案。MPSA-AB5000 平台具有鲜明技术优势。与流式细胞术、冰冻组织免疫组化、ELISA 和蛋白阵列等传统检测方法相比，该平台采用报告细胞系系统和免洗流程，在检测弱靶点结合生物大分子时，可避免传统方法中大量洗涤步骤造成的假阴性，其灵敏度优于 FACS 等技术。同时，系统信号放大能力可强效检测弱受体-配体相互作用，即使是 PD1 与 PDL1 这类解离常数处于微摩尔级的弱结合也可有效区分。此外，当初步检测到潜在脱靶结合信号时，还会通过 FACS 甚至 ELISA 验证等交叉验证实验策略进行系统确认。作为基于细胞的脱靶检测平台，该系统还可利用 293T 基因敲除（KO）细胞消除非特异性结合干扰，优化背景噪声。康源博创已建立行业领先的 293T 敲除细胞库，覆盖众多关键靶点，包括免疫检查点分子（如 B7H3）、肿瘤相关抗原（如 HER2、EGFR）和信号通路节点蛋白等。
针对 CAR 改造免疫细胞疗法检测，MPSA-AB5000 平台将 CAR 表达于报告细胞，在细胞水平直接进行特异性检测。这可高度模拟 CAR 改造免疫细胞疗法的真实作用机制，相比传统制备 CAR 融合蛋白的方法，更能准确反映 CAR 在实际应用中的特异性表现。
成功案例与广泛应用
作为国内提供膜蛋白筛选及生物治疗药物结合特异性评价服务的代表企业，康源博创在过去一年成功完成 100 余项抗体药物和 CAR 蛋白特异性评价项目，实践中验证了 MPSA-AB5000 平台的可靠性和有效性。在这些项目中，脱靶率最高达到 30%，凸显了脱靶问题的严重性，也体现出 MPSA-AB5000 平台在早期发现和降低脱靶风险方面的关键价值。根据美国 Integral Molecular 2024 年对 254 个临床前候选样本的回顾性分析，其中 83 个样本显示多特异性脱靶结合，脱靶率高达 33%。
MPSA-AB5000 膜蛋白脱靶筛选平台应用范围广泛。它不仅可用于抗体特异性筛选和 CAR 改造免疫细胞抗原识别特异性评价，也在药物靶点发现与验证中发挥重要作用。无论是创新抗体药物开发，还是 CAR-T 细胞疗法优化，该平台都能为研究人员和生物医药企业提供坚实技术支持。期待与您携手探索生物医药研发的无限潜力！
案例 1：VHH 抗体
案例 2：CLDN18.2 单抗
