在生物医药研发领域，候选分子的开发始终伴随显著科学挑战和临床转化风险。其中，脱靶结合因其潜在临床影响而日益受到关注。作为高度特异性的生物药，抗体药物的靶向准确性直接决定治疗窗口。然而，由于生物系统分子复杂性，包括蛋白同源性和构象多态性，抗体分子可能与非预期靶点发生交叉反应，即多特异性结合。例如，抗 PD1 抗体 SHR-1210 在 I 期临床试验中意外引发严重毛细血管瘤，研究提示这可能与其脱靶结合 VEGFR2 有关。另一个案例中，抗 β-淀粉样蛋白抗体 ABT-736 因脱靶结合血小板因子导致猴体内严重毒性，被迫终止开发。这表明，在早期精准检测和评估脱靶效应，是决定抗体药物开发成败的关键因素。
MPSA-AB5000 平台：应对脱靶问题的有力工具
康源博创推出 MPSA-AB5000 抗体脱靶筛选平台，为抗体特异性筛选和 CAR 改造免疫细胞抗原识别特异性评估提供全面、高效的解决方案。MPSA-AB5000 平台具有独特技术优势：其采用报告细胞系统结合免洗策略，在检测弱结合生物大分子时，可避免传统方法中大量洗涤步骤造成的假阴性，灵敏度优于 FACS 等技术。同时，该系统可放大信号，即便是弱受体-配体相互作用也能获得强读数。例如，PD1 与 PDL1 这类解离常数处于微摩尔级的弱相互作用，也可被清晰区分。
值得注意的是，康源博创拥有成熟的基因敲除（KO）细胞系构建平台，可为 MPSA-AB5000 脱靶筛选平台的实验优化提供有力支持。公司已建立行业领先的 HEK-293T 基因敲除细胞库，覆盖免疫检查点分子（如 B7H3）、肿瘤相关抗原（如 HER2、EGFR）和信号通路节点蛋白等众多关键靶点。293T 细胞作为易转染且具有相关性的人源细胞系，常用于蛋白过表达和结合活性筛选研究。然而，该细胞系中某些蛋白（如 B7-H3）内源性高表达，可能掩盖重要的靶向和脱靶相互作用。在脱靶筛选实验中，这些 293T KO 细胞系可有效消除非特异性结合干扰，优化背景值，使实验结果更准确可靠。例如，在针对肿瘤相关抗原抗体进行脱靶筛选时，使用该抗原基因敲除的 293T 细胞作为靶细胞，可清晰区分抗体对其他潜在靶点的结合信号，避免因非特异性结合造成误判，为抗体药物开发提供精准数据支持。
成功案例与广泛应用
作为国内提供膜蛋白筛选及生物药结合特异性评估服务的代表企业，康源博创已在实践中充分验证了 MPSA-AB5000 平台的可靠性和有效性。过去一年，公司成功完成 100 余项抗体和 CAR 蛋白特异性评价项目，其中多个项目使用 CRISPR 基因编辑 293T-KO 细胞系，高效支持抗体特异性筛选。
MPSA-AB5000 膜蛋白脱靶筛选平台应用范围广泛。除抗体特异性筛选和 CAR 改造免疫细胞抗原识别特异性评估外，该平台还可在药物靶点发现与验证中发挥重要作用。结合 CRISPR 基因编辑细胞模型，可实现针对各类靶点抗体的快速高效筛选、发现和脱靶评估，为抗体药物开发开辟新路径。
案例 1：WT HEK293T 细胞与 HEK293T-B7H3-KO 细胞
案例 2：WT HEK293T 细胞与 HEK293T-EGFR-KO 细胞
案例 3：293T-EGFR-B7H3-KO 细胞
