在 AACR 专题会议“Expanding and Translating Cancer Synthetic Vulnerabilities”上，Faith C. Fowler 等研究者报道，通过使用 HRO761 及两种新型 WRN 抑制剂对 MSI-H 细胞系进行持续处理，发现了 WRN 解旋酶结构域中的多个点突变。这些突变可直接阻断抑制剂结合并驱动耐药机制，凸显出开发可克服耐药的第二代 WRN 抑制剂及相应耐药细胞模型的迫切需求。为此，康源博创自主建立 WRN-MutCell 平台，利用 CRISPR/Cas9 技术在内源性 WRN 基因位点精准引入多种耐药突变，旨在为第二代 WRN 抑制剂的结构优化和功能评价提供有力支持。
Werner 综合征蛋白（WRN）属于 RecQ DNA 解旋酶家族，参与复制叉重启、基因组稳定性维持和端粒保护。在 MSI-H 肿瘤中，由于错配修复缺陷，DNA 二级结构不断积累，从而形成对 WRN 解旋酶活性的“合成致死”依赖。抑制 WRN 可选择性诱导 MSI-H 细胞死亡。
WRN 的生物学功能
- 复制叉维持：在 BRCA2 缺陷细胞中，WRN 通过其 ATPase/解旋酶活性促进复制叉重启，并限制 MRE11 介导的复制叉降解，从而保障基因组完整性。
- 解旋酶核心结构：WRN 解旋酶核心包含翼状螺旋（WH）结构域和 ATP 结合口袋。I852 残基位于关键 α 螺旋区域，I852F 突变可改变酶活性并重现耐药表型。
- 治疗相关性：WRN 在多种 MSI-H 实体瘤（结直肠癌、胃腺癌、子宫内膜癌等）中呈现合成致死依赖，使其成为精准治疗的新型靶点。WRN 缺失或抑制可显著增强 MSI-H 肿瘤对 DNA 损伤应答药物（如 PARP 抑制剂）的敏感性，为联合治疗提供依据。
WRN 抑制剂研发进展
- HRO761（诺华）：首个进入 I 期临床试验的非共价 WRN 抑制剂（NCT05838768），靶向 MSI-H 结直肠癌及其他 MSI 实体瘤。
- NTX-452（Nimbus Therapeutics）：一种新型非共价 WRN 抑制剂，在临床前模型中展现出强效合成致死作用，计划于 2025 年初开展临床试验。
- VVD-133214：通过化学蛋白质组学发现的共价、全变构 WRN 抑制剂，目前处于临床候选阶段。
- RO7589831：由美国 NCI 支持的 WRN 抑制剂临床研究，聚焦多种 MSI-H 肿瘤类型。
HCT116-WRN-KI 细胞系可精准模拟 MSI-H 肿瘤对 WRN 合成致死的依赖，可用于：
- 识别 WRN 相关耐药机制
- 筛选和评价新型 WRN 抑制剂
- 优化与其他 DNA 损伤类药物的联合用药策略
WRN-MutCell 平台产品与服务
HCT116-WRN-mut-KI 体外验证数据图
已构建的 HCT116-WRN-mut-KI 细胞系系列：
- HCT116-WRN-G729D-KI
- HCT116-WRN-G729D-I852F-KI
- HCT116-WRN-1577-1G>C-KI
- HCT116-WRN-F730L-KI
参考文献：
- Ferretti S, Hamon J, de Kanter R, Scheufler C, Andraos-Rey R, Barbe S, et al. Discovery of WRN inhibitor HRO761 with synthetic lethality in MSI cancers. Nature. 2024.
- Chan EM, Shibue T, McFarland JM, Gaeta B, Ghandi M, Dumont N, et al. WRN helicase is a synthetic lethal target in microsatellite unstable cancers. Nature. 2019 Apr;568(7753):551–556.
- Morales-Juarez DA, Jackson SP. Clinical prospects of WRN inhibition as a treatment for MSI tumours. NPJ Precision Oncology. 2022;6:85
